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高效液相色谱法和荧光偏振免疫法检测血清万古霉素浓度的比较

[导读]比较高效液相色谱(HPLC)和荧光偏振免疫(FPIA)测定血清万古霉素浓度方法的相关性。

   近半个世纪,万古霉素一直用于临床革兰阳性菌感染的治疗,其疗效显著,特别对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林表皮葡萄球菌等所致的严重感染效果良好。但由于药代动力学个体差异明显,且可能发生肾毒性与红人综合征等不良反应,因此用药期间应注意监测血药浓度,尤其是对需延长疗程或有肾功减退病史者更要注意。万古霉素浓度测定方法主要有高效液相色谱法(high performanceliquid chromatography,HPLC)和荧光偏振免疫法(fl uorescence polarization immunoassay,FPIA),但文献多报道高效液相色谱法测定血浆浓度。本试验旨在比较这两种方法的相关性,为临床分析提供技术参考。仪器LC-10A高效液相色谱仪,紫外检测器(日本岛津制作所);TDX-FLX荧光偏振免疫仪(美国雅培公司);PHS-2C精密pH计(上海虹益仪器仪表有限公司);TCQ-250超声波清洗器(北京医疗设备二厂) ;MVS-1漩涡混合器(北京金紫光科技发展有限公司);GM-0.33隔膜真空泵(上海津腾);TTL-DC多功能氮吹仪(北京同泰联);TGL-16G台式高速离心机(上海医用分析仪器厂);TGL-16G离心机(上海安亭科学仪器厂);JA 5003电子天平(中国上海天平仪器厂) 。B120医用低速离心机(河北白洋离心机厂)。HPLC和FPIA测定万古霉素血清或血浆浓度以来,有许多作者对其进行了研究和对比。1984年Pfaller等用5种方法测定万古霉素血浆浓度,并进行对比,结果HPLC与FPIA相关性最高,继此结果后又有许多作者用不同样本如组织等进行两种方法测定结果的比较,均有良好相关性。

  HPLC和FPIA测定万古霉素血浆或血清浓度各具特点,互有长短。高效液相色谱法具有灵敏度和准确度高、特异性强的优点,荧光偏振免疫法则具有简便、快速的优点。但前者有操作繁琐、最低检测线高、仪器干扰因素多、对操作人员要求高等不足;而后者具有特异性差、某些疾病影响结果等不足。另外从购置仪器投资来说,HPLC一次投资可检测品种较多,相对投资回报较高,而FPIA购仪器费用较高,受专用试剂供应限制。两种方法的相关性较好,因此不同实验室用不同的方法测定,其结果可以直接比较,可极大地方便患者,避免重复检查。







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